2020/12/21 12:03:21
高通量组织研磨仪对真菌细胞的破壁及DNA提取
Source：Shanghai Jingxin
实验目的
对真菌细胞进行破壁，提取其DNA。
实验原理
随着分子生物学技术的进展，PCR相关方法越来越多地被应用到真菌学研究中来，而真菌DNA的提取是包括分子诊断在内的所有实验的基础，简便快捷地提取真菌DNA，且获得的DNA完整、纯度高，对真菌分子生物学的研究有及其重要的意义。
真菌细胞壁以几丁质、葡萄糖为主构成细胞壁骨架，而基质则由多糖、甘露聚糖、糖蛋白、脂质等填充。丝状真菌坚韧厚壁的构成，需要较为繁琐的破壁手段，故真菌DNA的提取较细菌或其他组织细胞难度更大。为保证真菌PCR技术及其相关分子生物学技术的顺利开展，简便快捷地提取真菌DNA，且获得的DNA完整、纯度高，是必须解决的前提条件。
实验材料和器具
样品：真菌类
仪器：高通量组织研磨仪（上海净信，Tissuelyser-48）
耗材：离心管，研磨珠（上海净信）
试剂：TE Buffer，DA Buffer，E Binding Buffer，Elution Buffer
实验步骤
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实验结果
图1 提取DNA的检测 M：100bp 标准参照物
图2 提取DNA的PCR检测结果 M：100bp 标准参照物
Pervious：高通量组织研磨仪对多酚含量高的植物（木本植物）的细胞破壁
